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巢式PCR的定义,原理和步骤

发布时间:2019-05-15 01:51编辑:小编浏览(80)

    巢式PCR定义巢式PCR是聚合酶链反应(PCR)的修饰,其使用两对PCR引物(而不是一对)来扩增完整片段。
    PCR引物的第一对扩增片段与正常PCR相似。
    第二对引物,称为巢式引物(在通过PCR扩增的第一个片段中),使得通过PCR扩增的第二个片段比第一个扩增短。绑定到产品中。
    巢式PCR的优点在于,如果第一次扩增产生不正确的片段,则第二次错误片段中引物配对和扩增的概率极低。
    因此,巢式PCR的扩增是非常特异的。
    巢式PCR反应巢式PCR使用两组引物在两轮PCR中扩增特定的DNA片段。
    第二引物对的功能是特异性扩增位于第一轮PCR产物内的DNA片段。
    巢式PCR的实验步骤第一步:将第一对靶DNA模板引物与蓝色结合。
    第一对引物也可以与具有相似结合位点的其他片段结合,并且可以扩增各种产物。
    但是,目标片段只是一种产品(图中显示了许多产品)。
    步骤2:使用红色第二组引物进行通过PCR扩增的第一轮产物的第二轮PCR扩增。
    由于第二组引物位于第一轮PCR产物内,因此非靶标片段不太可能包含两组引物结合位点,因为它不太可能。第二组引物扩增非靶标片段。
    该巢式PCR扩增确保由于弱引物配对特异性引起的非特异性扩增导致的第二轮PCR产物几乎或完全未被污染。
    原文英文是:定义巢式PCR巢式PCR不是一对PPRimprimer(但不是一对)用于扩增配对反应(PCR)片段化。
    第一对PCR部分分析了一系列与PCR相似的片段。
    然而,第二对引物,称为嵌套模拟器(在第一张纸上检查),允许应用尚未存在的第二PCR产物。它与一个片段绑定在一起。
    类似PCR的优点在于,如果证明了错误的PCR片段,则其可靠性显示在打印机设置中第二次或第二次看到的其他区域中。
    因此,巢式PCR与特异性PCR扩增非常不同。
    巢式PCR反应巢式PCR以重新评估用于使用PCR消息网络扩增ANN的特定片段的打印机组。
    在第一个PCR产物中发现了用于扩增小特异性DNA的第二个引物对。
    嵌套PCRStepOnePCRReactionDiagramSteps:ANNA组合的目的是设置为以蓝色显示的第一个打印机组。
    引物可以与替代替代品以及与提供多种产品的引物类似的引物相关联,但这些PCR产物中只有一种能够提供预期的序列(几种产品)未显示)。
    步骤2:在每秒显示一组新的打印机之后,对第一次PCR反应的PCR产物进行第二次PCR。
    因为BORROWERS是在第一个PCR产品上进行测试的,所以两个引物组很可能无法特异性鉴定含有寄生虫的PCR产物。
    该巢式PCR扩增确保来自第二PCR扩增的PCR产物具有未从原始靶序列特异性鉴定的PCR产物的小污染。